枯草杆菌怎样培养

更新时间： 2024-05-20 18:49:02

培养方法如下：

1、取受体菌接种于BY培养液中，37摄氏度培养到对数生长早中期。此时OD620应在0.4左右，培养时间约为4到5小时。

2、将培养后的菌液离心，弃去上清液，再用生长培养基（GM液）洗菌一次，然后将菌体细胞重新悬浮在与BY培养液等体积的GM液中。37摄氏度继续振荡培养到对数生长后期。此时OD620应在0.6至0.9，培养时间约为3到5小时。

3、以1比10的比例将GM液中培养的菌液稀释于转化培养基（TM液）中。即取菌液0.2ml加入1、8mlTM液中，在20乘以150mm的试管中，37摄氏度振荡培养90分钟。

4、加入供体质粒，至最终浓度1ug每毫升，于20乘以150mm的试管中，37摄氏度振荡培养30分钟。

5、取200ul涂布抗性选择平板，37摄氏度培养48小时。

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